小叶黑柴胡的研究进展
临床常用中药柴胡因品种来源繁多，化学成分复杂，品种之间有效成分含量悬殊，导致质量良莠不齐，临床疗效不稳。笔者收集自1993年以来公开发表的小叶黑柴胡相关文献22篇，从品种来源、药材鉴定、化学成分和药理毒理等方面进行整理总结，认为小叶黑柴胡属于优质野生资源，药用价值大。
【关键词】小叶黑柴胡；药材鉴定；化学成分；药理毒理；研究进展
【中图分类号】R282.7 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2016）08-0026-03
柴胡是伞形科柴胡属植物，始载于《神农本草经》，位列上品。具有疏散退热，舒肝解郁，升举阳气的作用。用于感冒发热，寒热往来，胸肋胀痛，月经不调，子宫脱垂，脱肛，为常用中药材。中医临床常用药柴胡除药典正品外，品种来源繁多，质量良莠不齐。现野生资源枯竭、价格昂贵，市场流通以家种品为主。而传统中药以野生为主，现市场流通的家种品木质化严重，质量堪忧。主流观点认为野生品品质优于家种品，现商品柴胡非经典记载柴胡。为探讨药用柴胡来源之一的小叶黑柴胡的药用价值，笔者收集自1993年以来公开发表的小叶黑柴胡相关文献22篇，就其药材鉴定、化学成分和药理毒理进行综述，现报道如下。
1药用柴胡的种类
2010版中国药典仅收载了柴胡（Bupleurum chinense DC.）和狭叶柴胡（Bupleurum scorzonerifolium Willd.） 2种的干燥根为药用柴胡的原植物，按性状不同，分别习称 “北柴胡”及“南柴胡”，并明确指出大叶柴胡（Bupleurum longiradiatum Turcz.）有毒，不可当柴胡药用[1]。《甘肃省中药材标准（2009年版）》[2]、《宁夏中药材标准（1993年版）》[3]均收载“黑柴胡”药材，前者品种为黑柴胡（Bupleurum smithii Woiff.）、小叶黑柴胡（Bupleurum smithii Woiff.var.parvifolium Shan et.Y.Li）或黄花鸭跖柴胡（Bupleurum commelynoideum Boiss.var.flaviflorum Shan et.Y.Li）的干燥根或根茎，后者品种为小叶黑柴胡（Bupleurum smithii Woiff.var.parvifolium Shan et.Y.Li）的干燥根或根茎。两省标准均收载小叶黑柴胡。
2小叶黑柴胡的流通和分布
小叶黑柴胡在甘肃、宁夏等省区属有临床习用历史的品种和主流种类，药用历史悠久。两省药品监管部门认为和正品有相似功效，分别收入本省中药材标准，允许在市场流通，代正品柴胡药用。要求中药饮片生产、经营企业以“黑柴胡”命名，但不得以药典正品“柴胡”命名，以示区别。据文献报道，小叶黑柴胡在浙江平阳按伪品对待[4]，宁波按混淆品对待[5]。
小叶黑柴胡为伞形科柴胡属植物。分布于我国甘肃、宁夏、青海、内蒙古等地，生长于海拔2700～3700m的地区，常生长在山坡草地或林下，目前尚未由人工引种栽培。潘胜利等[6]在对小叶黑柴胡的产地调查中发现其分布于甘肃、宁夏、青海、内蒙古等省区及河北、山西、陕西的北部等地。生于1400～3000m的山坡草地、山谷、山顶阴处。小叶黑柴胡在甘肃主要分布于张掖、武威、兰州、定西、甘南及陇南等地[2]。
3小叶黑柴胡的药材性状
宁夏标准[3]记载：本品性状呈圆柱形或圆锥形，常弯曲，稀有分枝，主根长4～7cm，直径0.2～0.5cm。表面黑褐色或棕褐色，粗糙，有多数突起的须根痕，根头膨大，多分枝，常残留茎基及棕褐色膜质叶基。质较松脆，易折断，断面略平坦，皮部浅棕色，具多数裂隙，木部黄白色，有放射状列隙。气微香，味微苦辛，具败油气。
潘胜利等[6]认为小叶黑柴胡根头部常有数个茎基成指状丛生，茎基部具多数片状残留叶柄，有时还带有少量残留的叶。根圆柱形至长圆锥形，长6～12cm，直径0.4～0.8cm，侧根2～3个；表面黑褐色至灰褐色，偶可见较疏的横纹，具皮孔，有时可见支根痕形成的瘤状突起。质松脆，易折断，断面较平坦，皮部黄棕色，常有较多空隙；木部浅黄色，辐射状排列明显。气微香。胡双丰[5]认为小叶黑柴胡根呈圆柱形，较小，长5～7cm，直径0.3～0.5cm，根头分歧，顶端残留多数茎基和绿色叶基，下侧具两行呈疣状突起的不定芽，根下部多分枝，有的中间骤然膨大形成枣核样突起。表面黑褐色，有浅色支根痕及横向皮孔。质较松脆，易折断，断面显纤维性，栓皮层易剥落。油腥气较浓。甘肃标准与宁夏标准不同的地方是甘肃标准直径略大，约0.2～0.7cm，笔者分析与甘肃标准中有其他两个品种有关。潘胜利等认为长度和直径较大，笔者分析与产地不同有关，其他特征基本相同。
4小叶黑柴胡的化学成分
4.1柴胡皂甙王英华等[7]从小叶黑柴胡根中分得5个三萜皂甙和2个三萜皂甙元。根据理化性质和波谱分析，分别鉴定为柴胡皂甙a、柴胡皂甙d、柴胡皂甙b2、柴胡皂甙b4、chikusaikosideI、柴胡皂甙元F、柴胡皂甙元G，均为首次从该植物中分离得到。曹纬国等[8]测定青海产小叶黑柴胡中总皂苷含量大于2.77%，柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量分别高于0.54%和0.14%，其中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量远高于中国药典中柴胡含量项下的标准。提示青海产小叶黑柴胡具有较高的药用价值。宁夏标准[3]报告，宁夏产小叶黑柴胡含总皂甙1.415%，略低于北柴胡，高于同属其他柴胡。其中柴胡皂甙a为0.18%，柴胡皂甙d为0.20%。潘胜利等[6]曾对云南省的8种药用柴胡及北柴胡和红柴胡，通过组织化学鉴定法，发现柴胡皂甙在柴胡根中主要存在于韧皮部和射线部位，而木质部中存在极少。
4.2挥发油杨永健等[9]从小叶黑柴胡挥发油中分离鉴定出27个化合物，主要成分有5-甲基麝香草醚（18.22%）、对-聚伞花素（9.75%）、环己烷（7.79%）、2-戊基呋喃（2.71%）、二甲基乙缩醛己醛（2.69%）等。宁夏标准[3]报告甘肃临夏产者含挥发油0.05%。脂肪族化合物特别是其中的烷烃类化合物，可作为柴胡属植物挥发油的特征性成分而与其它挥发油相区别[6]。 4.3黄酮周伟等[10]对小叶黑柴胡地上茎叶部分化学成分进行研究，分离鉴定了5黄酮类成分：水仙苷、芦丁、异鼠李素、广寄生苷、槲皮素，均系首次从该植物中分离获得。潘胜利[6]报道柴胡的地上部分存在较多的黄酮类成分。
4.4甾醇徐秀珍等[11]采用薄层扫描法测定小叶黑柴胡与北柴胡中甾醇类成分的含量，结果小叶黑柴胡与北柴胡的含量分别为0.5125mg/g和0.2408mg/g，小叶黑柴胡的甾醇含量高于北柴胡一倍，提示小叶黑柴胡的抗炎作用优于北柴胡。
4.5多糖潘胜利等[6]进行柴胡糖类的定量分析，糖和多糖含量最高的为赞皇的北柴胡（15.97%）和汶川柴胡（15.95%），小叶黑柴胡为（13.75%）。
4.6苯提取物潘胜利等[6]进行苯提取物的定量分析，含量最高的为小叶黑柴胡（兰州）5.06%。
5小叶黑柴胡的药理毒理研究
5.1药理研究赵玉珍等[12-13]通过动物（小鼠、家兔）实验表明，小叶黑柴胡水煎剂和粗皂甙有显著的解热作用，相同剂量的小叶黑柴胡的水煎剂和粗皂甙之间无显著差异。小叶黑柴胡乙醚取物和粗皂甙有显著的抗炎作用，作用优于北柴胡。其粗皂甙有北柴胡粗皂甙类似的镇痛作用。小叶黑柴胡粗皂甙还能显著降低四氯化碳（CCl4）肝损伤小鼠的血清转氨酶，有显著的保肝作用，它降转氨酶的作用比北柴胡粗皂甙和联苯双酯都强。小叶黑柴胡乙醚提取物使小鼠胸腺明显增重，使小鼠血清IgG明显升高，有增强免疫功能的作用，而北柴胡对免疫功能无显著作用。根据这些结果，认为小叶黑柴胡不仅可以代替北柴胡供药用，而且在保肝、调节机体免疫功能方面也有进一步研究和开发利用价值。
潘胜利等[6]通过CCl4损伤小鼠肝法进行了6种柴胡保肝作用比较实验，发现保肝作用锥叶柴胡和小叶黑柴胡最强。胡淑婷等[14]选择小叶黑柴胡的乙醚提取物，作用于体外培养的人胃腺癌MGC-803细胞，观察小叶黑柴胡诱导人胃腺癌MGC-803细胞的凋亡效应。结果小叶黑柴胡可诱导人胃腺癌MGC-803细胞凋亡。王铮等[15]通过观察小叶黑柴胡总多糖对小鼠多项免疫指标的影响，探讨其免疫调节作用。结果小叶黑柴胡总多糖对小鼠免疫功能有调节作用。吴梓春[16]以小叶黑柴胡茎叶中提取的黄酮类物质为材料，对其抗氧化性能进行了体外实验。结果小叶黑柴胡茎叶总黄酮（TFA）提取物对自由基都有较好的清除能力，并呈现很好的量效关系。TFA提取物具有很好的抗氧化作用。詹雪晶等[17-18]采用化学物质α-萘异硫氰酸酯（α-naphthyl isothiocyanate，ANIT）诱发大鼠肝内胆汁淤积模型，用TFA给大鼠灌胃给药，观察血清、肝组织指标变化。结果显示，TFA能明显提高大鼠损伤肝细胞的细胞膜Na+，K+-ATP酶活性，促进胆汁酸的分泌，胆汁排泄增加，降低大鼠血清中的中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素（TBIL）、谷酰胺转肽酶（GGT）的水平。采用CCl4致小鼠急性肝损伤，与模型组相比较，经TFA预防性治疗后，治疗组小鼠血清中ALT、AST的水平明显降低，同时肝组织中丙二醛（Malondialdehyde，MDA）的含量明显下降、超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）的活力明显增强。TFA保肝降酶作用明显，对CCl4所致急性肝损伤小鼠有很好的保护作用。刘秀芳等[19-20]采用小鼠尾静脉注射刀豆蛋白诱发小鼠免疫肝损伤模型，观察血清ALT和AST，并测定小鼠肝组织中MDA的含量。在光学显微镜下观察肝脏病理组织的变化。与正常组相比，TFA能降低小鼠免疫肝损伤模型的ALT和AST活力和肝组织中MDA的含量，能明显改善肝组织的病理学改变，能提高小鼠单核巨噬细胞系统的吞噬功能，使小鼠的免疫功能提高，对免疫性肝损伤小鼠有一定的保护作用。采用分光光度法，测定TFA对多种自由基的清除效果，验证其抗氧化活性，结果TFA对DPPH・自由基活性、・OH自由基和O2-・自由基的清除率可达94.67%、93.60%和90.04%，TFA具有很好的抗氧化活性。
罗磊等[21]通过代谢物组学方法对小叶黑柴胡总黄酮防治ANIT所致大鼠急性黄疸型肝损伤过程中的尿液代谢组进行研究，结果显示，给药组和模型组相比，大鼠尿液代谢物中马尿酸、庚酰肉毒碱、5β-胆甾烷-3α，7α，12α，23R，25-醇、4-羟双氢鞘氨醇、二氢神经鞘氨醇、溶血磷脂酰乙醇胺（0∶0/24∶0）、苯乙尿酸等含量降低，6-酮前列腺素F1α和3-磺基去氧胆酸含量升高，提示小叶黑柴胡总黄酮明显缓解ANIT引起的大鼠急性黄疸型肝损伤，可用于防治急性黄疸型肝损伤。
5.2毒理研究赵玉珍等[12]通过动物实验表明，小叶黑柴胡水煎剂、乙醚提取物、粗皂苷给小鼠灌胃，半数致死量（LD50）分别为大于200g/kg、（10.25±1.33）g/kg和（6.00±1.11）g/kg。小叶黑柴胡毒性较小，其水煎剂和粗皂甙小鼠灌胃毒性按原生药计算小于北柴胡，唯其乙醚提取物小鼠灌胃毒性按原生药计算大于北柴胡。小叶黑柴胡乙醚提取物（主要为甾醇、木质素等）含量高于北柴胡，可能是其有毒性的原因之一。王有志等[22]曾报道小叶黑柴胡的乙醚提取物有一定的毒性。
6小结及展望
柴胡属植物大多数品种在我国不同地区实际在供药用或有药用历史，并不局限于药典标准。有关小叶黑柴胡地方标准收载情况，笔者只查到了甘肃、宁夏收载的原始文献，据其他文献报道山西（1987年）、青海（1992年）标准亦有收载，但因年代久远，未找到原始文献。建议省级药监部门及时更新地方药材标准。地方标准中药材跨辖区销售的合法性问题方面，国家药品标准分为药典标准、部颁标准和省、自治区、直辖市标准（地方标准），笔者理解只要列入国家药品标准即为合法，但部分省区药监部门将小叶黑柴胡列为非法，造成中药材资源浪费。建议国家药监部门出台地方标准药材流通相关法规。关于小叶黑柴胡的鉴定，文献描述不一致方面，建议鉴定样本应注明产地。因同一品种，生长环境不同，性状理化、特征则不同。药监部门制定标准时应广泛采集标本，求同存异，统一标准。
小叶黑柴胡根含皂苷及皂苷元、挥发油、甾醇、糖和多糖等，其中皂苷、甾醇含量高于药典北柴胡。地上茎叶部分含水仙苷、芦丁、异鼠李素、广寄生苷、槲皮素等黄酮类成分。
小叶黑柴胡根部分具有解热、抗炎、镇痛、保肝、增强免疫和诱导胃癌细胞凋亡作用，抗炎、保肝作用优于北柴胡，免疫增强作用显著。茎叶黄酮类物质对动物胆汁淤积性、化学性、免疫性肝损伤均有良好保护作用。其机制与黄酮类物质发挥清除自由基、提高Na+、K+-ATP酶和SOD活性、促进胆汁酸分泌、增加胆汁排泄作用，进而降低血清肝酶、胆红素和肝组织MDA水平相关。
综上，小叶黑柴胡在临床中应用具有明显疗效，且毒副作用小，属于优质野生资源，药用价值大，值得进一步研究，开发利用。
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