高效液相色谱法测定感冒热毒清合剂中连翘苷的含量

[关键词] 感冒热毒清合剂；连翘苷；高效液相色谱法；含量测定

[Key words] Ganmao-reduqing Mixture； Phillyrin； High performance liquid chromatography； Content determination

1 仪器与试药

高效液相色谱仪LC-20A型（日本岛津）、电子天平AE240（瑞士Mettler）、HH-S数控恒水浴锅（金华市文华科教实验仪器厂）、KQ-400DB型数控超声清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

2 方法与结果

2.1 定性鉴别

2.2.2 对照品溶液制备 精密称取连翘苷对照品3.44 mg，加入25 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，即为连翘苷对照品溶液。

2.2.3 供试品溶液制备 取感冒热毒清合剂样品50 mL，加水饱和的正丁醇50 mL萃取2次，合并2次的正丁醇层溶液，加氨试液50 mL洗涤，弃去水层，正丁醇层置80℃水浴蒸干，加甲醇溶解，转移至25 mL容量瓶中，定容至刻度，作为连翘苷含量测定的供试品溶液。按处方比例及工艺制备不含连翘的阴性对照溶液适量，按供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。

2.2.4 专属性考察 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照品溶液各20 μL注入液相色谱仪，测定，结果阴性对照品溶液在连翘苷峰相应的保留时间附近无干扰峰出现，色谱图见图1。

2.2.6 精密度试验 精密吸取连翘苷对照品溶液10 μL，重复进样5次，测定峰面积。结果平均峰面积的RSD = 1.80%，表明仪器精密度良好。精密吸取连翘苷对照品溶液10 μL，重复进样5次，测定峰面积。结果平均峰面积的RSD = 0.99%，表明仪器精密度良好。

3 讨论

连翘为本合剂处方中的主要成分，连翘有效成分连翘苷具有极强的抗菌、抗病毒活性，其对金黄色葡萄球菌的抑制作用比四环素强，是迄今为止连翘属植物中发现的抗菌活性最强的成分之一，为中药连翘的主要特征性成分。连翘酚对金黄色葡萄球菌、志贺菌也有一定的抑菌作用。连翘还可直接破坏内毒素结构，以消除或减轻细菌毒素引起的休克等各种中毒症状[2]。对连翘进行定性及含量测定极其重要。

本研究对感冒热毒清合剂中的连翘苷进行定性鉴别及含量测定，建立了连翘指标成分的含量测定方法，该方法结果准确，重复性好，可作为医院制剂-感冒热毒清合剂的质量评价方法。

[参考文献]

[2] 胡静，马琳，张坚，等.连翘的研究进展[J].中南药学，2012，10

（10）：760-764.

[9] 张飞，田粟，吕明霞，等.HPLC同时测定连翘花及叶中绿原酸等活性成分的含量[J].中国实验方剂学杂志，2011， 17

（9）：103-106.