肇庆特色黄皮果挥发油成分及清除羟自由基能力

黄皮，为芸香科黄皮属植物，主要产于广东、广西、海南、云南、福建等地。黄皮具有较高的药用价值，其根、茎、叶、果实、果皮均可入药，具有消除胸腹胀满、生津、止渴、顺气、镇咳等功效。其中果实不仅香甜可口，性温味辛，具有丰富的营养价值，且能行气消食，润肺生津等，很受人们青睐。近年来，又有研究说明产地和环境气候的不同，各地的黄皮挥发油亦有不同，我们对肇庆特色黄皮果实挥发油成分进行提取和分析，有利于更好探究其药理作用，而探究挥发油对羟自由基清除率的影响则可初步了解其抗氧化性能，对肇庆黄皮在药用方面的开发和利用有重要意义。

1 材料、试剂与仪器

2 实验方法

2.1 挥发油的提取

称取100g新鲜黄皮果，加蒸馏水捣成匀浆，用挥发油提取器进行提取，提取6h后，油水经高速冷冻离心机离心分离初步除水后，再加入少许无水硫酸钠除水后经0.45um滤膜过滤器过滤后得到无色透明的挥发油。

2.2 挥发油成分分析条件

2.2.1 色谱条件

色谱柱RTX-5MS石英毛细管柱（30m*0.25mm*

0.25um）；升温程序为60℃，停留5min，再以4℃/min升温至250℃，保留7min；载气为氦气，柱流量为1.5ml/min，进样量1ul，分流比为10：1。

2.2.2 质谱条件

离子源EI源，离子源温度230℃，电子能量70eV，接口温度为230℃，溶剂延迟4min，扫描范围30～600amu。

2.3 羟自由基清除能力研究

2.3.1 各浓度的挥发油溶液的制备

2.3.2 其他溶液的配制

2.3.3 挥发油的羟自由基清除率的测定

用移液枪取9mmol/L硫酸亚铁溶液 1mL、9mmol/L水杨酸-乙醇溶液1mL，不同浓度的样

品溶液1mL，最后加8.8mmol/L过氧化氢1mL启动反应，37℃反应30min；以蒸馏水为参比，在510nm下测定各浓度的吸光度。考虑到样品本身的吸光值，以9mmol/L硫酸亚铁溶液1mL、9mmol/L水杨酸-乙醇溶液1mL，不同浓度的样品溶液1mL和1mL蒸馏水作为样品的本底吸收值，重复做三次，以平均值为测定结果。按下式计算・OH清除率：

A0―空白对照液的吸光度；

Ax―加入样品溶液后的吸光度；

Ax0―不加显色剂H2O2 ，样品溶液本底的吸光度。

3 实验结果

3.1 挥发油得率

采用水蒸气蒸馏法提取肇庆特色黄皮果所得得率为0.4%。

3.2 成分分析

3.3 挥发油对羟自由基清除率的影响

4 分析与讨论