猪流行性腹泻病毒的分离及间接ELISA的建立

摘要：猪流行性腹泻疾病是世界上比较容易发生的疾病之一。这种病一旦发生，那将造成很严重的经济损失。现在，在中国这种病的发生率依然很高，人们对这种病是非常关注和关心的。因为它对人们的生活会造成很大的影响。其实，猪流行性腹泻疾病是一种病毒性疾病，这种病的发病率高，死亡率也高。那么本文就猪流行性腹泻病毒的分离及间接ELISA的建立进行阐述，同时也介绍了猪流行性腹泻疾病和这种病毒。

关键词：猪流行性腹泻病毒 分离 间接ELISA的建立

猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒引起的。这种病的主要症状是腹泻，呕吐和脱水。猪流行性腹泻疾病是一种易感性疾病，任何年龄段的猪都易感，一年四季均可感染。猪流行性腹泻疾病不仅会使猪本身受到损害，同时也给人们带来严重的经济损失，这种病间接地也会影响到水资源，从而威胁到人们的健康。因此，我们必须找到一些方法来预防这种疾病的发生。那么，首先要做的就是学会一些方法将病毒进行分离，以了解它的结构与特征，这样可以采取一些措施来减轻该种病毒的毒性。

1.猪流行性腹泻的简介

1.1什么是猪流行性腹泻病毒

猪流行性腹泻疾病是由猪流行性腹泻病毒引起的一种肠道传染疾病，这种疾病发生率最高的是冬季，当猪感染上这种疾病时，通常会表现为腹泻，脱水，呕吐以及精神沉郁。因此说，猪流行性腹泻病毒就是能够引起猪流行性疾病的一种传染性病毒。这种病毒通常是从口鼻进入，作用在小肠，进而造成猪的腹泻。

猪流行性腹泻疾病一旦感染了猪，尤其是仔猪，在短时期内极容易死亡，并且死亡率也很高。这样就直接的增加了猪的饲养成本，进而就会造成人们的经济损失。

1.3猪流行性腹泻病毒的特点

通常来说，猪流行性腹泻病毒具有一些特点。首先，这种病只发生在猪身上，其他动物不易感，也就是说这种病毒对宿主的选择有特异型。其次，这种病毒的传染性和感染性很高，它可以通过口鼻进入，然后再通过一些其他的途径陆续的感染周围的生活环境，进而使其它猪受到感染，这样就会造成大片感染，从而成为流行性传染疾病。另外，猪流行性腹泻病毒大多发生于我国的冬季，也就是寒冷的季节，当然我们也不排除夏季发病的可能性。猪流行性腹泻病毒发病结果是非常严重，猪一旦感染上这种疾病将会影响到今后的正常生活，即使康复也会有发育不良的现象。如果病情严重，还会造成大量猪死亡。因此说这种疾病是很复杂的一种疾病，这种病毒的毒力也是很强的。

2.分离

2.1猪流行性腹泻病毒的分离内容

在分离之前，我们先要做好一些准备，准备好实验器材，实验材料。那么，选择实验材料也是很有讲究的，我们需要选择一些比较典型的病毒样品，感染这种疾病的粪便就是非常好的实验材料。具体的过程大体如下，在所获取的粪便中加入一些胰蛋白酶处于室温条件下，作用一段时间。然后将PK-15细胞单层在接种前也用同样方法，用同样使用量的胰蛋白酶的细胞维持液作用数分钟，倒去细胞维持液，接入经过处理的病毒分离物，置37℃吸附60mni后，加人细胞维持液置37℃培养，每天观察细胞病变。

2.2猪流行性腹泻病毒对于分离的结果

由于猪流行性腹泻病毒的独特性，所以这种病毒是很难分离的。但是，伴随着我们对该种病毒的了解与研究，通过实验方法发现，可以运用带毒传代法将病毒分离，然后用荧光抗体进行检测，在第三代时就发现了少量的荧光颗粒，在第六代时这种颗粒就非常明显了。

2.3对结果的分析和讨论

这种方法打破了传统的不能在细胞上培养猪流行性腹泻病毒的观念。实验证明，病毒在经过数次培养后，它的毒性会渐渐的减弱。根据这种特点，我们就可以使猪流行性腹泻病毒的毒性减弱。从而，在一定程度上减轻猪流行性腹泻疾病的发病率，减少人们的经济损失。

3猪流行性腹泻病毒间接检侧ELISA的建立

3.1猪流行性腹泻病毒间接检测ELISA的方法

ELESA抗体的检测方法，这种方法主要是用来检测某一区域内猪对流行性腹泻病毒的抗体水平，这种方法和病毒的分离方法相同。也需要对实验材料进行严格的选择。

3.2猪流行性腹泻病毒检测ELISA的意义

我们通过一些实验发现，ELESA检测方法可以使检测结果更加科学与精确。通过这种实验方法，我们可以了解到猪对流行性腹泻病毒的抵抗力。这样，我们就可以采取一些好的方法来减轻猪流行性腹泻病毒的毒性，这可以减少猪的感染率和死亡率。同时，减少人们的经济损失。这种检测方法对预防猪流行性腹泻疾病的发生有着重要的意义。

4.结语：

猪流行性腹泻疾病在世界上具有普遍的流行性，很多猪都容易感染此病，甚至威胁到猪的生存，给人们的经济造成很大的损失，同时，也会威胁到人类的健康。随着现代科学技术不断发展，我们有能力对猪流行性腹泻病毒进行研究并加以了解，要想能够对该类病毒进行研究，首先做的就是学会一些方法对猪流行性腹泻病毒进行分离和间接检侧ELISA的建立

参考文献：

[2]董丽娜，高凤山，许崇波，等.表达猪流行性腹泻病毒CO「基因的重组乳酸茵的构建与鉴定 司.畜牧兽医学报 2008