肉羊重点疫病的实验室检测技术
肉羊重点疫病的实验室检测技术
按照石嘴山市科技局《肉羊疫病监测与防治研究项目》的要求,组织进行了肉羊疫病病原和免疫效果实验室检测。根据项目实施方案的要求,分阶段开展了口蹄疫病原学与抗体水平和布病病原学的采样、实验室检测,系统整理了实验资料。现将检测完成情况及统计、分析结果和对肉羊疫病实验室检测技术的初步探讨求教于大家,以供肉羊疫病防控研究者参考。
1 材料与方法 1.1 检测内容和要求 口蹄疫进行病原和免疫效果2项内容的采样检测,布病进行病原检测。实行季度抽检和不定期抽检,每年检测3次以上,每年采样数量在240份以上,监测小组按照要求对监测结果进行汇总,并完成半年、全年性阶段性监测工作总结和分析报告。 1.2.1 口蹄疫免疫效果监测 口蹄疫免疫效果监测按照国标NY/SY150-2000采用口蹄疫正向间接血凝试验操作,检测结果判定标准为:O型口蹄疫抗体效价≥2的判为免疫合格。 1.2.3 布病病原学检测 布病病原学检测按照国标GB/T18646-2002采用虎红平板凝集实验与试管凝集试验操 作。 2 试验结果 监测工作组负责各试验点病料采集和实验室检测工作,对检测结果进行汇总统计和分析报告,并完成阶段性监测工作总结。实施项目以来,监测工作组按照实施方案的要求,在课题研究期间,共计完成O型口蹄疫抗体水平检测524份,完成口蹄疫病原学检测524份,完成布鲁氏菌病病原学检测524份。 2007年共计进行了3次集中采样和2次分散采样。其中在4月份、7月份和10月份进行了集中采样。在各试验点共计采集样品238份,完成口蹄疫病原学监测223份,完成口蹄疫免疫效果监测223份,完成布病病原学监测238份。 2.1.2 布病病原学监测情况 石嘴山市动物疫病监测实验室采用虎红平板凝集试验检测223份,可疑样品采用试管凝集试验进行复检,结果为7个阳性。 2.2 2008年度检测项目及结果 2.2.1 口蹄疫病原学监测情况 经宁夏回族自治区疫病控制中心采用PCR实验检测,301份样品口蹄疫病原学监测结果为阴性。 2.2.2 布病病原学监测情况 石嘴山市动物疫病监测实验室采用虎红平板凝集实验与试管凝集实验检测样品286份,结果为阴性。 以上检测分析结果见表1。表1中为了便于免疫后不同天数抗体消长规律的统计分析,序号不分年度,按免疫后采样时的天数,即“免疫天数”顺序进行排列。 3 讨论 3.1 结果的可靠性分析 在每日采样工作结束后,于当晚完成实验室样品收检登记并分离动物血清等工作。样品采集和分析处理方法符合国家和自治区有关监测采样技术要求,检测中严格按照国家标准和行业标准执行,结果真实可靠。 3.2 口蹄疫病原学分析 根据口蹄疫病原学检测为阴性的结果,说明被检测试验羊群中不存在口蹄疫病毒感染。 3.3 布鲁氏菌病病原学分析 根据布病病原学检测结果为7(+),说明部分试验羊群已经受到布病病原侵袭,需要采取措施净化羊群。但羊群中存在的流产现象不是布病所致。 3.4 免疫效果分析 根据以上检测结果,分时段进行抗体水平统计分析,分析结果见表2。 4 结论 1)通过检测结果分析说明,羊的口蹄疫防治工作在坚持程序化免疫的条件下,免疫羊口蹄疫抗体水平可以保护到161d以上。同时,通过采取综合防治措施,可以有效减少口蹄疫病原的存在和传播,杜绝疫情流行。 2)根据布病病原学检测结果分析可知,在检测结果阳性羊群及其区域,在坚决扑杀深埋无害化处理阳性羊只的同时,采取连续进行布病疫苗强制免疫的措施,是非常必要和有效的手段。 3)由于受目前各地实验室检测设备条件和能力所限,羊只的梭菌病、羊痘只能进行临床疫情监测,对出现症状和病变的羊群坚持进行相应疫菌苗免疫2年以上,能够及时有效地控制羊只梭菌病、羊痘疫情的发生。 4)要巩固口蹄疫、梭菌病、羊痘、布病的防治效果,还需要扩大宣传教育面和加强防控措施的落实,实行羊痘、布病发病区以及阳性检出区的强制免疫和净化措施。这是目前防止和净化石嘴山市舍饲羊口蹄疫、梭菌病、羊痘、布病的唯一有效的手段。 5)养殖户羊只生产周转快,羊只存栏变动大,致使跟踪监测和防治工作量加大,要真实掌握舍饲羊疫病发生情况,在调查研究过程中需要进行大力宣传教育和说服工作,给调查研究造成了一定的困难,调查结果受到时间和地点的限制。