灵芝菌糠悬浊液培养粉状毕赤酵母研究

关键词：菌糠；培养基；膨化；毕赤酵母

Key words：waste material from fungal culture （WMFC）；culture；puffing；Pichia farinose

由于菌糠来源于食用菌栽培培养基，大部分营养成分已经被食用菌所利用，或转化成菌丝成分，或转化为具有化感作用的代谢产物，使得菌糠对于同种或异种食用菌菌丝体有明显的抑制作用[5-6]。其中，大部分为食用菌的细胞壁成分，为结构复杂的杂多糖类物质[7]。因此，通过挤压膨化处理这种物理手段，对其菌糠进行预加工，以期改变原有的糖类、纤维类物质的组成，并去除化感物质，不失为一种廉价而有效的处理废弃菌糠的方法。

因此，本研究以灵芝菌糠以及膨化处理后的灵芝菌糠作为发酵培养基原料，进行培养毕赤酵母的初步研究，为食用菌菌糠的新的利用方式提供理论依据，并验证膨化处理方式在食用菌菌糠处理方面的可行性。

1 材料和方法

1.1 菌 种

粉状毕赤酵母Pichia farinosa，编号FL7，引自天津大学化工学院，分离自天津市林业果树研究所实验基地所采集的食用菌菌糠废弃物堆肥，使用0.5 mL YEPD液体培养基[8-9]分装于1 mL聚丙烯离心管中于4 °C冰箱保藏。

菌糠悬浊液培养基的制备采用以下2种经过不同处理的灵芝菌糠。

普通灵芝菌糠：取赤芝Ganoderma lucidum栽培结束，子实体已采收后所余含有菌丝体及剩余培养基之菌糠，经粉碎机粉碎后，过孔径为0.25 mm的筛，80 °C烘干至恒质量备用。

玉米粉：取超市所售玉米粉过孔径为0.25 mm的筛，80 °C烘干至恒质量备用。

1.3 培养基

1.4 培养方法

1.5 计数方法

以菌落形成单位（colony-forming units，CFU）来表示活酵母生物量，以CFU・mL-1用以表示各处理发酵液中的活酵母生物量，计算公式：

CFU= ×10n

式中，CFU为每毫升发酵液中的活酵母菌落形成单位，CFU・mL-1；v为点样样品体积，mL；N为样品斑点中的酵母菌落数；n为N所对应的样品稀释次数。

以上所得各处理3个重复中各个发酵液中平均活酵母数，按日期汇总后，原始数据录入EXCEL软件，为计算方便，将全部数据换算成以e为底数的自然对数值ln CFU・mL-1，输入SPSS19.0软件进行数据分析。

2 结果与分析

2.1 毕赤酵母的最大生物量

测试培养基各处理中，毕赤酵母的最大生物量平均值（同处理的3个重复）如表2。

2.2 方差分析

综上，玉米粉添加量对酵母生物量的影响受菌糠浓度的制约，只有在0.050 g・mL-1的菌糠浓度下才有促进生长的作用，这显然和玉米粉加入后改变了培养基的碳氮比有关。在添加玉米粉的情况下，酵母的生物量随灵芝菌糠的浓度增大而增大。

3 结 论

两种不同处理的菌糠在0.100 g・mL-1浓度下培养的解磷酵母生物量最大，在0.050 g・mL-1浓度下对酵母生物量的影响近似。

玉米粉添加量对酵母生物量的影响受菌糠浓度的制约，只有在0.050 g・mL-1的菌糠浓度下才有促进生长的作用，在添加玉米粉的情况下，酵母的生物量随灵芝菌糠的浓度增大而增大。

参考文献：

[2] 王艳荣，张海棠，刘长忠.棉子壳菌糠的营养价值分析[J].山西农业科学，2008（3）：45-36.

[3] 张建华，乌云，张忠兵，等.蘑菇菌糠营养成分分析[J].内蒙古农业科技，2000（6）：14-16.

[8] 杨静静，孟镇，钟其顶，等.黄酒生产中酵母菌多相鉴定技术研究[J].中国酿造，2011（8）：53-56.

[9] 符玲.一株解磷酵母菌的筛选及其解磷机理与特性的研究[D].天津：天津大学，2010.