金樱子鞣质提取率影响因素分析及提取条件优化

[摘要] 目的 优化金樱子中鞣质的超声提取工艺。 方法 采用磷钼钨酸-紫外分光光度法测定鞣质含量，在单因素试验的基础上，选取液料比、超声提取时间和乙醇百分浓度作为自变量，金樱子鞣质提取率为因变量，对自变量各水平进行多元线性回归和二项式拟合，采用星点设计-响应面法选择最佳工艺条件，并进行预测分析。 结果 最佳工艺为：乙醇浓度75%，料液比1∶30，超声提取时间60 min，提取温度为50℃。 结论 优化的金樱子中鞣质超声波提取工艺简便可靠、稳定、提取率高，为金樱子中鞣质的开发利用奠定基础。

[关键词] 金樱子；鞣质；超声提取；响应面法

[Abstract] Objective To optimize the process of ultrasonic extracting effective constituents from Rosa Laevigatae Fructus of tannin. Methods The content of tannin was determined by phosphomolybdotungsitc acid-UV spectmphotometry solvent. Based on single-factor tests， with ethanol percent， solid-liquid ratio， extraction time as independent variables and yield of tannin from Rosa Laevigatae Fructus as dependent variable， multiple linear regression and binomial fitting was adopted by central composite design model， and determine optimum extraction technology， and the forcast analysis was done. Results The best extraction process was as followed： the concentration ethanol of 75%， ratio of solid-liquid of 1∶30， extraction time of 60 min， extraction temperature of 50℃. Conclusion This optimized extraction process is simple and reliable， it can laid a certain foundation for development and utilization of tannins from Rosa Laevigatae Fructus.

[Key words] Rosa Laevigatae Fructus； Tannin； Ultrasonic extraction； Response surface method

星点设计是在二水平析因设计的基础上，加中心点和星点组成，实验次数较少，对非线性拟合的实验设计较适宜，具有实验设计简单、试验次数少、精密度高的特点[6]。响应面法集数学和统计学方法于一体，是建模和多元变量最优化的一种统计方法[7]。对于中药有效成分的提取工艺研究，星点设计以及效应面优化法是重要的实验条件设计、优化方法之一，具有数据量大、预测性好、直观的优点，比正交和均匀设计更适用于探索性的试验研究。因此采用此方法研究金樱子中鞣质的超声提取工艺，为金樱子的合理开发利用提供一定的科学依据。

1 仪器与试药

金樱子，2013年10月采自贵州遵义县团溪镇，经贵阳医学院药学院王晓丽教授鉴定为蔷薇科植物金樱子的成熟果实。

2 方法与结果

2.1 鞣质的含量测定

2.2 样品测定

2.2.3鞣质含量的计算 鞣质的含量=总多酚含量-不被吸附多酚含量，鞣质是可被干酪素吸附的多酚；鞣质提取率（%）=提取出的鞣质含量/药材中鞣质的含量×100%。

2.3 单因素试验考察

2.4响应面法优选

2.5 验证实验

验证响应曲面法所得到的最优条件，检验得到的结果是否可靠，在最佳条件下分别提取了3次（考虑到实际操作的情况，将鞣质最佳提取条件修正为料液比1∶

30、超声时间为60 min、乙醇浓度为75%），提取温度为50℃，结果金樱子鞣质平均提取率为6.10%，与预测值的偏差0.94%，偏差不大吻合较好，说明优选的提取超声工艺预测性良好。

3 讨论

3.1 提取方法的选择

超声提取现已应用于大部分植物化学成分的提取[13]，利用超声辐射产生的强烈扰动效应、空化效应等多种效应来增加物质分子运动速度、频率、溶剂的穿透力以及加速提取成分进入溶剂，这样就能避免高温对提取成分造成的影响。鞣质为结构复杂的多酚类化合物[14]，是一类热不稳定成分。因此本实验采用超声波提取金樱子中鞣质，节能省时，且能有效地提高金樱子鞣质的提取率。

3.2单因素的考察

通过单因素与星点设计-响应面法相结合的试验方法，对金樱子中总鞣质的提取工艺进行了优选。因响应面优化的前提是所设计的实验点应包括较佳的实验条件，一旦实验点选取不当，就不能得到较好的优选结果。因此本实验在进行星点设计之前，对可能影响金樱子中鞣质提取率的各因素分别进行考察，确定了各个因素的较佳水平，并缩小了各因素的水平范围，这对于通过效应面法优选较佳提取工艺有利，也有利于预测结果的准确性。

基于Design-Expert 7.0.0试验设计软件，通过二次回归得到了金樱子鞣质提取率与乙醇百分浓度、液料比、超声提取时间的二次回归模型，经方差分析得出该回归模型是合理可靠的，能较好地预测金樱子鞣质提取率。再利用该模型的响应面及其等高线直观得出对影响金樱子鞣质提取率较大因素的相互作用，得到最优工艺为：乙醇百分浓度为75%，超声提取时间为60 min，液料比为1∶30，超声提取温度为50℃。因此，利用星点设计-响应曲面法对金樱子鞣质超声提取工艺进行优选，能获得最优的工艺条件，这样能有效减少工艺操作的盲目性，简单易行、省时节能且提取效率高，为金樱子鞣质的开发利用提供实验依据，对其他类药材中鞣质的提取有着一定的参考依据。 [参考文献]

[4] 郑荣梁，黄中洋.自由基生物学[M].北京：高等教育出版社，2007.

[5] Sharif T，Auger C，Alhosin M，et al. Red wine polyphenols cause growth inhibition and apoptosis in acute lymphoblastic leukaemia cells by inducing a redox-sensitive up-regulation of p73 and down-regulation of UHRFl [J]. Eur J Cancer，2010，46

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（1）：664.